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我公司針對(duì)目前乳制品行業(yè)及質(zhì)量監(jiān)測(cè)單位檢驗(yàn)阪崎腸桿菌的需求及情況，對(duì)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)相應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行了改進(jìn)，使得阪崎腸桿菌檢出率較之前有很大的改進(jìn)。擴(kuò)充并完善了相關(guān)的微生物檢測(cè)試劑，使得技術(shù)操作人員能更準(zhǔn)確、快捷的檢測(cè)出目標(biāo)菌。
現(xiàn)我公司，依據(jù)GB 4789.40-2010食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)，推出成套的阪崎腸桿菌檢驗(yàn)解決方案，為生產(chǎn)企業(yè)及檢驗(yàn)單位提供方便。
![\"\"](\"/UploadFiles/main/Images/2014/11/20141107143758.jpg\")
圖1：GB 4789.40-2010阪崎腸桿菌檢驗(yàn)流程圖
表1：實(shí)驗(yàn)操作所用培養(yǎng)基及生化試劑
|
功能階段 |
實(shí)驗(yàn) |
產(chǎn)品序號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
類別 |
|
前增菌 |
1 |
023130 |
緩沖蛋白胨水（BPW） |
250g |
瓶（干粉） |
|
CP0560A |
緩沖蛋白胨水（BPW） |
9 ml×20支 |
盒（管裝） |
||
|
增菌 |
2 |
022212 |
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯基礎(chǔ)（MLST） |
250g |
瓶（干粉） |
|
SR0180 |
萬古霉素（改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯配套試劑） |
1 ml×10支 |
盒（西林瓶） |
||
|
CP0750 |
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（MLST-Vm） |
10 ml×20支 |
盒（管裝） |
||
|
平板分離 |
3 |
CRM006 |
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基（DFI） |
1000 mL |
瓶（干粉） |
|
CRM006B |
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基（DFI） |
90mm×20 |
盒（平板） |
||
|
生化鑒定 |
4 |
024072 |
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)TSA |
250g |
瓶（干粉） |
|
024079 |
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(大豆消化酪素瓊脂培養(yǎng)基)TSA |
90mm×20 |
盒（平板） |
||
|
5 |
029170 |
氧化酶試紙 |
10片/盒 |
盒 |
|
|
6 |
075280 |
L-賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
075290 |
氨基酸脫羧酶對(duì)照 |
20支 |
盒（西林瓶） |
||
|
7 |
075270 |
L-鳥氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
8 |
075590 |
L-精氨酸雙水解酶培養(yǎng)基 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
075600 |
精氨酸雙水解酶對(duì)照 |
20支 |
盒（西林瓶） |
||
|
9 |
029110 |
無菌液體石蠟 |
10 mL×1支 |
瓶 |
|
|
10 |
075090 |
D-山梨醇 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
11 |
075110 |
L-鼠李糖 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
12 |
075050 |
D-蔗糖 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
13 |
075560 |
D-蜜二糖 |
20支 |
盒（西林瓶） |
|
|
14 |
022120 |
西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基 |
250 g |
瓶（干粉） |
|
|
15 |
071870 |
阪崎腸桿菌生化鑒定盒 |
11種×10支 |
盒（西林瓶） |
|
培養(yǎng)基：TSA |
培養(yǎng)基：阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基DFI |
|
|
|
|
菌株：阪崎腸桿菌 ATCC29544 |
![\"\"](\"/UploadFiles/main/Images/2014/11/20141107144124.jpg\")
![\"\"](\"/UploadFiles/main/Images/2014/11/20141107144138.jpg\")
GB 4789.40-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)
第一法阪崎腸桿菌的檢驗(yàn) 操作步驟
1.1 前增菌和增菌
取檢樣100 g（mL）加入已預(yù)熱至44 ℃裝有900 mL 緩沖蛋白胨水的錐形瓶中，用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解，36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h±2 h。移取1 mL 轉(zhuǎn)種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2h。
1.2 分離
1.2.1 輕輕混勻mLST-Vm 肉湯培養(yǎng)物，各取增菌培養(yǎng)物1 環(huán)，分別劃線接種于兩個(gè)阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板，36 ℃±1 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。
1.2.2 挑取1 個(gè)～5 個(gè)可疑菌落，劃線接種于TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養(yǎng)48 h±4 h。
1.3 鑒定
自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落，進(jìn)行生化鑒定。阪崎腸桿菌的主要生化特征見表2。可選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)。
表 2 阪崎腸桿菌的主要生化特征
|
生化試驗(yàn) |
特征 |
|
|
黃色素產(chǎn)生 |
+ |
|
|
氧化酶 |
- |
|
|
L-賴氨酸脫羧酶 |
- |
|
|
L-鳥氨酸脫羧酶 |
（+） |
|
|
L-精氨酸雙水解酶 |
+ |
|
|
檸檬酸水解 |
（+） |
|
|
發(fā)酵 |
D-山梨糖 |
（-） |
|
L-鼠李糖 |
+ |
|
|
D-蔗糖 |
+ |
|
|
D-蜜二糖 |
+ |
|
|
苦杏仁甙 |
+ |
|
|
注：+＞99%陽性： -＞99%陰性；（+）90%-99%陽性；（-） |
1.4 結(jié)果與報(bào)告
綜合菌落形態(tài)和生化特征，報(bào)告每100 g（mL）樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
第二法 阪崎腸桿菌的計(jì)數(shù) 操作步驟
2.1 樣品的稀釋
2.1.1 固體和半固體樣品：無菌稱取樣品100 g、10 g、1 g 各三份，加入已預(yù)熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分溶解，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18 h±2 h。分別移取1 mL 轉(zhuǎn)種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。
2.1.2 液體樣品：以無菌吸管分別取樣品100 mL、10 mL、1 mL 各三份，加入已預(yù)熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中，輕輕振搖使充分混勻，制成1:10 樣品勻液，置36 ℃±1 ℃培養(yǎng)18h±2h。分別移取1 mL 轉(zhuǎn)種于10 mL mLST-Vm 肉湯，44 ℃±0.5 ℃培養(yǎng)24 h±2 h。
2.2 分離、鑒定
同1.2，1.3。
2.3 結(jié)果與報(bào)告
綜合菌落形態(tài)、生化特征，根據(jù)證實(shí)為阪崎腸桿菌的陽性管數(shù)，查MPN 檢索表，報(bào)告每100 g（mL）樣品中阪崎腸桿菌的MPN 值（見國標(biāo)附錄Ｂ中表B.1）。
相關(guān)國標(biāo)下載地址：
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GB 4789.40-2010 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 阪崎腸桿菌檢驗(yàn) |
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http://www.huankai.com/Train/HBdetail_105020015_100000016983785.html |
