1. English

                  恒溫擴(kuò)增熒光法檢測技術(shù)應(yīng)用于食品中沙門氏菌的快速檢測

                  發(fā)布時間:2017-10-13      瀏覽次數(shù):2852    分享:

                         一、技術(shù)原理

                         試劑盒基于環(huán)介導(dǎo)恒溫擴(kuò)增技術(shù)(LAMP)熒光法檢測,利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶,使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu),引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng),實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下(60-65℃)進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑,陰陽性結(jié)果顯色差異顯著,擴(kuò)增結(jié)束后可以通過觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果,無需開蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。LAMP是一種新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù),該技術(shù)無需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可,因此,與常規(guī)PCR相比,LAMP技術(shù)更適合現(xiàn)場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。

                          二、應(yīng)用于食品中沙門氏菌的快速檢測

                         恒溫擴(kuò)增熒光法檢測技術(shù)可運(yùn)用于快速檢測食品中的沙門氏菌等致病菌。 應(yīng)用于食品快速檢測有兩種方式: 1、快速篩查。對食品樣品快速增菌后,直接采用基因檢測試劑盒來快速篩查有沒可疑致病菌(對大多數(shù)致病菌在13小時內(nèi)即可完成篩查); 2、快速鑒定。對食品樣品進(jìn)行增菌,平板分離,使用基因檢測試劑盒對可疑菌落進(jìn)行快速準(zhǔn)確的鑒定(1小時內(nèi)完成鑒定)。

                         三、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增熒光法檢測試劑盒組成

                          四、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增熒光法檢測試劑盒操作指南


                          五、環(huán)凱恒溫擴(kuò)增熒光法檢測試劑盒特點(diǎn)

                         操作簡單:通過幾部加樣后,60-65℃范圍內(nèi)恒溫條件下即可完成擴(kuò)增。

                         使用便捷:一管式凍干,免去繁瑣的配制步奏。 儀器簡單 擴(kuò)增條件簡單,能提供恒溫裝置即可。

                         特異性高:比傳統(tǒng)PCR靈敏度高10-100倍,可檢測5-20個拷貝。

                         快速判讀:使用合適的增菌液收集到足夠菌體后,40-60分鐘內(nèi)可完成檢測,肉眼觀察顏色變化即可判讀結(jié)果。全部檢驗(yàn)流程僅需約13h(詳細(xì)檢驗(yàn)流程參見說明書)。

                         六、沙門氏菌快速篩選操作流程


                         七、沙門氏菌可疑菌落快速鑒定操作流程

                         八、恒溫擴(kuò)增試劑盒產(chǎn)品列表


                         九、需要配套的儀器及耗材列表



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