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恒溫?zé)晒夥ㄔ噭┖锌焖俸Y選、鑒定創(chuàng)傷弧菌解決方案

發(fā)布時(shí)間：2018-06-06 瀏覽次數(shù)：3132 分享：

一、技術(shù)原理：

試劑盒基于恒溫?zé)晒夥z測(cè)，利用兩對(duì)特殊引物和具有鏈置換活性的Bst DNA聚合酶，使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu)，引物順利與模板結(jié)合并進(jìn)行鏈置換擴(kuò)增反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)在恒溫條件下（60-65℃）進(jìn)行連續(xù)快速擴(kuò)增。

反應(yīng)體系中加入了顯色指示劑，陰陽(yáng)性結(jié)果顯色差異顯著，擴(kuò)增結(jié)束后可以通過(guò)觀察熒光顯色劑的顏色變化判讀結(jié)果，無(wú)需開蓋避免了擴(kuò)增產(chǎn)物交叉感染性的可能性。恒溫?zé)晒夥ㄊ且环N新型的恒溫核酸擴(kuò)增技術(shù)，該技術(shù)無(wú)需常規(guī)PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設(shè)計(jì)要求，只需提供一個(gè)適宜的恒定溫度即可，因此，與常規(guī)PCR相比，恒溫?zé)晒夥夹g(shù)更適合現(xiàn)場(chǎng)高通量快速檢測(cè)，具有簡(jiǎn)單、快速、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。

二、環(huán)凱恒溫?zé)晒夥ㄔ噭┖刑攸c(diǎn)

快速簡(jiǎn)便將酶、引物等反應(yīng)組分混勻后進(jìn)行干粉化處理，增加試劑穩(wěn)定性，使用時(shí)減少溶液配制步驟，更為便捷，整個(gè)檢測(cè)反應(yīng)可在1 h內(nèi)完成；

判讀簡(jiǎn)單反應(yīng)前加入顯色指示劑，反應(yīng)后通過(guò)肉眼觀察反應(yīng)液顏色變化或者經(jīng)熒光監(jiān)測(cè)儀器跟蹤熒光圖譜的變化判讀結(jié)果，直觀方便，且可有效避免反應(yīng)后開蓋造成的氣溶膠污染。

特異性高利用靶基因序列上的多個(gè)獨(dú)立區(qū)域設(shè)計(jì)多條引物，保證擴(kuò)增反應(yīng)的高度特異性；

靈敏度高最低檢驗(yàn)限達(dá)到18 CFU/Test；